紫外分光光度計(jì),基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。
發(fā)展歷史
1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)在1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時(shí),顏色的強(qiáng)度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),這就是著名的朗伯比爾定律。
1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將朗伯比爾定律應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設(shè)計(jì)了第一臺(tái)比色計(jì)。
1918年,美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局制成了第一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)。此后,紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使分光光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。
結(jié)構(gòu)與功能
由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五大部分組成。
功能
1.光源:是提供符合要求的入射光的裝置,有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區(qū),一般為鎢燈和鹵鎢燈,波長(zhǎng)范圍是350~1000nm;氣體放電光源用于紫外光區(qū),一般為氫燈和氘燈,連續(xù)波長(zhǎng)范圍是180~360nm。
2.單色器:功能是將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束,它是分光光度計(jì)的心臟部分。
3.吸收池:又稱比色皿,供盛放試液進(jìn)行吸光度測(cè)量之用,其底及兩側(cè)為毛玻璃,另兩面為光學(xué)透光面,為減少光的反射損失,吸收池的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向。根據(jù)材質(zhì)可分為玻璃池和石英池兩種,前者用于可見光光區(qū)測(cè)定,后者用于紫外光區(qū)。
4.檢測(cè)器:是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置,測(cè)量吸光度時(shí),并非直接測(cè)量透過(guò)吸收池的光強(qiáng)度,而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為電流信號(hào)進(jìn)行測(cè)試,這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測(cè)器。
5.信號(hào)顯示系統(tǒng):是將檢測(cè)器輸出的信號(hào)放大,并顯示出來(lái)的裝置。
注意事項(xiàng)
1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過(guò)程中禁止打開樣品室蓋。
2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過(guò)滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),需選用石英比色皿。
3.測(cè)定時(shí),禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時(shí)清理干凈。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理人員認(rèn)可后方可離開。